Medio EMJH modificado para el cultivo de Leptospira interrogans serogrupo Ballum / Modified EMJH medium for cultivation of Leptospira interrogans serogroup Ballum

El serogrupo Ballum agrupa cepas de crecimiento fastidioso, con requerimientos nutricionales más exigentes que otras cepas patógenas de Leptospira. Fue evaluada la influencia de 37 compuestos nutricionales sobre el crecimiento de Leptospira interrogans serogrupo Ballum, tomando como base para el estudio al medio sintético EMJH. El crecimiento microbiano fue estimado espectrofotométricamente y por conteo directo en cámara de Petroff-Hausser. La estabilidad de la virulencia fue evaluada en hamsters mediante el cálculo de la dosis letal media. La estabilidad de la antigenicidad fue evaluada mediante Western blotting con antisuero policlonal específico. Bajo condiciones de cultivo controladas se logró triplicar los rendimientos de biomasa comúnmente obtenidos en el medio EMJH sin afectación de la virulencia y antigenicidad tras el incremento de la concentración de Tween 80 y la incorporación de acetato de sodio y extracto de carne. El incremento de la concentración de al menos 6 componentes del EMJH o la incorporación de una variedad de nuevos nutrientes no estimularon apreciablemente los rendimientos de biomasa o la velocidad específica de crecimiento del microorganismo. Los resultados obtenidos permiten disponer de un medio de cultivo enriquecido capaz de sustentar elevados rendimientos de biomasa de este serogrupo exigente de mayor circulación en humanos en Cuba.

Strains within the Ballum serogroup of spirochete Leptospira show fastidious growth with more exigent nutritional requirements than those of other Leptospira pathogenic strains. The influence of 37 nutritional compounds on the growth of Leptospira interrogans serogroup Ballum was investigated employing the synthetic EMJH medium as the base for the study. Microbial growth was estimated spectrophotometrically and direct counts were performed with a Petroff-Hausser counting chamber. Virulence stability was evaluated by calculating the mean lethal dose in hamsters. Antigenicity stability was evaluated by Western blotting using a specific antiserum. Cell yields commonly obtained in EMJH were triplicated without virulence or antigenicity depletions after culturing in a modified EMJH medium with an increased concentration of Tween 80, and the incorporation of sodium acetate and beef extract. Neither the increased concentration of at least 6 components of EMJH nor the incorporation of a variety of new nutrients stimulated cell yields or the growth rate of the microorganism. The results allow us to make use of an enriched culture medium that promotes high cell yields of this fastidious serogroup most prevalent in humans in Cuba.

Freqüência de aglutininas anti-Leptospira interrogans em soros sangüíneos de bovinos, em Minas Gerais, de 1980 a 2002 / Frequency of anti-Leptospira interrogans agglutinins in bovine serum samples in Minas Gerais, Brazil, 1980 to 2002

Foram analisados os resultados de exames de microaglutinação rápida, para pesquisa de aglutininas anti-Leptospira interrogans, em 39.012 soros sangüíneos de bovinos provenientes de 398 (47 por cento) municípios de Minas Gerais de 1980 a 2002. As sorovariedades mais freqüentes foram: hardjo (amostra Norma), 23,7 por cento, hardjo (OMS), 19,7 por cento, hardjo (hardjobovis), 13,8 por cento, e wolffi, 13,2 por cento. Os resultados mostraram relevância da hardjo como problema prioritário nas leptospiroses em bovinos em Minas Gerais. A baixa porcentagem de soros reagentes à pomona (2,8 por cento) e a mini (amostra Neguita) (3,0 por cento) indica que essas sorovariedades devem ser consideradas para esclarecer casos clínicos em bovinos quando a hardjo (OMS), hardjo (Norma) e hardjo (hardjobovis) não forem detectadas nos testes sorológicos. As porcentagens de reagentes para as sorovariedades canicola e icterohaemorrhagiae foram inferiores a 1 por cento. A infecção por Leptospira interrogans é endêmica em bovinos em Minas Gerais.

Hemolysin production by Leptospira interrogans serovar canicola in a protein-free medium with hemin.

Leptospira interrogans serovar canicola strain moulton was grown to a high cell density in a protein-free medium. When hemin was added to this medium, hemolysin was produced. Hemolysin was not detected when other porphyrins or cytochrome C were substituted for hemin in the medium.